一、 sham 手術(shù)標準化流程（改良對照法）

1. 麻醉與體位
   • 10% 水合氯醛（3.5ml/kg，ip）聯(lián)合 2% 利多卡因（0.1ml 切口浸潤）
   • 仰臥位固定，頸前區(qū)備皮，碘伏 - 酒精消毒 3 次
   • 術(shù)中維持肛溫 36.8±0.5℃（體溫維持儀控制）
2. 血管解剖操作
   • 頸前正中 2cm 縱切口，顯微鑷（精細度 0.1mm）分離胸骨舌骨肌
   • 暴露左側(cè)頸總動脈（CCA）分叉部，游離頸外動脈（ECA）、頸內(nèi)動脈（ICA）各 5mm（保留迷走神經(jīng)）
   • 關(guān)鍵對照步驟：不結(jié)扎 ECA，僅用 8-0 絲線虛繞標記（模擬線栓操作但不插入）
   • 生理鹽水沖洗術(shù)野，確認無出血后逐層縫合（皮膚用 6-0 可吸收線皮內(nèi)縫合）
3. 術(shù)后復(fù)蘇
   • 恒溫毯（37℃）監(jiān)護至自主睜眼，單籠飼養(yǎng)（避免模型組干擾）
   • 術(shù)后 6h 內(nèi)每小時記錄呼吸頻率、角膜反射，皮下注射 0.9% NaCl（5ml/kg）補液

二、 假手術(shù)有效性驗證（雙盲評估）

三、 對照周期管理（與模型組同步）

• 急性期（0-24h）：每 2h 觀察切口滲出，給予氨芐西林（20mg/kg，im）預(yù)防感染
• 亞急性期（2-3d）：每日稱量體重（降幅＜5%），記錄攝食量（≥15g/d）
• 特殊記錄：手術(shù)耗時（精確至分鐘，與模型組差值＜2min），出血量（棉球稱重法＜0.1g）

四、 組織學(xué)對照檢測（與模型組平行操作）

1. TTC 染色（術(shù)后 72h）
   • 取腦前經(jīng)升主動脈灌流生理鹽水 200ml，2mm 冠狀切片（共 6 片）
   • 2% TTC 染色液（pH7.4，含 0.1% NaN3）37℃避光染色 25min
   • 圖像處理：ImageJ 測量梗死體積（假手術(shù)組預(yù)期＜1% 腦體積）
2. 血腦屏障檢測
   • 術(shù)后 72h 尾靜脈注射 2% 伊文思藍（4ml/kg），2h 后取腦
   • 腦組織勻漿離心（3000rpm，10min），分光光度計測上清 OD620 值
   • 假手術(shù)組 EB 含量＜5μg/g（模型組＞20μg/g）

五、 質(zhì)量控制要點

1. 操作標準化：由同一術(shù)者完成（累計 MCAO 手術(shù)＞200 例），假手術(shù)操作增加 "血管分離 - 復(fù)位" 步驟（模擬線栓推送）
2. 盲法實施：神經(jīng)評分、標本處理均由不知分組的實驗員完成（雙盲編碼系統(tǒng)）
3. 統(tǒng)計學(xué)預(yù)設(shè)：假手術(shù)組與模型組比較采用獨立樣本 t 檢驗，P＜0.01 視為有意義差異